Alteraciones Hematológicas en el Extendido de Sangre Periférica

Las alteraciones de los glóbulos rojos se pueden clasificar en dos grandes grupos según su origen: defectos intrínsecos (generalmente hereditarios) y defectos extrínsecos (adquiridos). Los defectos intrínsecos están asociados a cambios en la membrana celular, alteraciones metabólicas, modificaciones en la eritropoyesis y anomalías en la hemoglobina. Por su parte, los defectos extrínsecos se relacionan con trastornos orgánicos que indirectamente afectan el número y la morfología de los eritrocitos.

Para detectar estas alteraciones, se utilizan dos exámenes básicos: el hemograma y el frotis de sangre periférica (FSP) teñido con coloraciones de Romanowsky. El FSP permite observar cambios morfológicos como anisocitosis (variación en el tamaño), poiquilocitosis (variación en la forma), hipocromía (disminución de hemoglobina), policromatofilia y presencia de inclusiones eritrocitarias.

💡 ¡Dato clave! El extendido de sangre periférica puede revelar información diagnóstica crucial que no se detecta en un hemograma automatizado, especialmente en alteraciones morfológicas sutiles de las células sanguíneas.

La correcta identificación de estas alteraciones permite al médico orientar el diagnóstico hacia patologías específicas, como anemias, trastornos mieloproliferativos, infecciones o reacciones a medicamentos.

Objetivos y Competencias del Estudio de Sangre Periférica

El análisis del extendido de sangre periférica busca tres objetivos principales: reconocer las alteraciones morfológicas de las células sanguíneas, realizar un reporte adecuado en pacientes con alteraciones hematológicas, e interpretar correctamente los resultados obtenidos.

Al dominar esta técnica, desarrollarás la competencia para interpretar de manera clara y eficiente el extendido, comprendiendo la terminología especializada y siguiendo un orden sistemático en el reporte. Esta habilidad es esencial para tu formación profesional en el campo de la hematología.

El fundamento del extendido de sangre periférica (ESP) radica en que permite observar tanto el número como las características morfológicas de las células sanguíneas circulantes. Esta evaluación cuantitativa y cualitativa puede contribuir significativamente al diagnóstico de diversas patologías y, junto con el examen clínico, puede ser determinante en el estudio de pacientes con sospecha de inmunodeficiencias primarias u otros trastornos hematológicos.

Para realizar este procedimiento necesitarás materiales básicos como: muestra de sangre total, láminas portaobjetos, colorante de Wright, agua destilada, solución buffer, goteros, microscopios y aceite de inmersión.

💡 Recuerda: La calidad del extendido y de la tinción son factores críticos para una correcta interpretación; una mala técnica puede llevar a conclusiones erróneas.

Procedimiento para la Preparación y Lectura del Extendido

Para preparar correctamente un extendido de sangre periférica, debes seguir estos pasos cuidadosamente:

Una vez obtenido el frotis sanguíneo, déjalo secar completamente durante 15-20 minutos. Luego, coloca la preparación en un soporte y cúbrela con el colorante de Wright por aproximadamente 5 minutos (este tiempo puede variar según el lote del colorante). Posteriormente, añade solución amortiguada tamponada en partes iguales hasta obtener un brillo metálico y espera 1 minuto adicional.

Finalmente, lava con agua corriente, deja secar, y coloca la lámina en el microscopio. Con pequeño aumento, revisa la calidad de la coloración y selecciona el sitio para iniciar el reporte. Aplica una gota de aceite de inmersión y enfoca con un aumento de 100x para comenzar tu análisis.

Para realizar la lectura del frotis, primero utiliza el objetivo 10x para rastrear toda la extensión, asegurando una distribución regular de leucocitos y verificando si hay células inmaduras, agrupamiento de plaquetas o patrones anormales de distribución de eritrocitos. El estimado de leucocitos se obtiene contando el número de leucocitos en cinco campos visuales, determinando el promedio y multiplicándolo por 300.

Con el objetivo de 100x, observa la morfología de las plaquetas y realiza un estimado contando su número en 5-10 campos, determinando el promedio y multiplicándolo por el factor de conversión apropiado (aproximadamente 20,000).

💡 Consejo práctico: Para obtener resultados confiables, evalúa mínimo 1,000 eritrocitos cuando reportes anormalidades morfológicas específicas, así podrás expresar tus hallazgos en porcentajes precisos.

Evaluación de la Morfología Eritrocitaria

La morfología de los glóbulos rojos se evalúa observando cuidadosamente cuatro aspectos: tamaño, forma, color y presencia de inclusiones. Cualquier alteración debe registrarse con precisión siguiendo los criterios establecidos por el Comité Internacional de Estandarización en Hematología (ICSH).

La anisocitosis (variación en el tamaño) se reporta en porcentajes y se clasifica como: moderada (2+) cuando afecta al 11-20% de las células, y marcada (3+) cuando supera el 20%. Los equipos automatizados la detectan a través del índice ADE o RDW (amplitud de distribución eritrocitaria). Dentro de la anisocitosis podemos encontrar:

• Macrocitosis: células más grandes de lo normal
• Macrocitos ovales: células grandes de forma oval
• Microcitos: células más pequeñas de lo normal

La poiquilocitosis es la variación en la forma de los eritrocitos. El ICSH recomienda especificar el tipo exacto de alteración morfológica. Entre las formas anormales más comunes tenemos:

• Esferocitos: células que han perdido su biconcavidad
• Acantocitos: células esféricas pequeñas con proyecciones irregulares
• Drepanocitos: células en forma de media luna (células falciformes)
• Codocitos: células en "diana" o "sombrero mexicano"

💡 Importante: La presencia de esquistocitos (fragmentos de eritrocitos) es tan significativa clínicamente que se reporta incluso cuando representa menos del 1% de los eritrocitos, pues puede indicar microangiopatía hemolítica.

La correcta identificación de estas alteraciones morfológicas es fundamental para orientar el diagnóstico hacia patologías específicas como anemias hemolíticas, hemoglobinopatías o trastornos mieloproliferativos.

Tipos de Poiquilocitos y su Significado Clínico

La poiquilocitosis (variación en la forma) incluye diversos tipos de células con morfología alterada, cada una con significado clínico específico:

Los acantocitos (células con proyecciones irregulares tipo espuela) se observan en abetalipoproteinemia, anemias hemolíticas y mielofibrosis. Los drepanocitos (células falciformes) contienen hemoglobina S que polimeriza cuando hay baja tensión de oxígeno, característicos de la anemia falciforme.

Los codocitos (células diana) presentan un aspecto de "tiro al blanco" y aparecen en enfermedades hepáticas, talasemias y anemia ferropénica. Los eliptocitos (células en forma de lápiz) se ven en eliptocitosis hereditaria y deficiencia de hierro.

Los equinocitos (células con proyecciones regulares) pueden aparecer por aumento del pH sanguíneo o como artificio técnico. Los esquistocitos (fragmentos celulares) son importantes indicadores de daño mecánico, presentes en anemia hemolítica microangiopática, CID y uremia.

Los estomatocitos (células en forma de boca) se observan en alcoholismo y enfermedades hepáticas, mientras que los dacriocitos (células en forma de lágrima) son típicos de mielofibrosis y metaplasia mieloide.

Para reportar adecuadamente, el ICSH establece que formas como esferocitos, acantocitos y codocitos se consideran "moderados" (2+) cuando representan del 5-20% de eritrocitos y "muchos" (3+) cuando superan el 20%. Para formas como esquistocitos y drepanocitos, el umbral es más bajo $1-2$ debido a su mayor significado clínico.

💡 Dato relevante: La presencia de esquistocitos, incluso en pequeñas cantidades (1%), es una señal de alerta que puede indicar coagulación intravascular diseminada o anemia hemolítica microangiopática, condiciones que requieren atención médica inmediata.

Otras Alteraciones Eritrocitarias Importantes

La hipocromía se refiere a eritrocitos con escasa hemoglobinización, que presentan un área de palidez central exagerada (más de un tercio del diámetro celular). Suele asociarse con microcitosis y se clasifica como moderada (2+) cuando afecta al 11-20% de las células y marcada (3+) cuando supera el 20%.

La policromatofilia (o policromasia) identifica a eritrocitos jóvenes con RNA residual que se tiñen de color gris-rosado a azul-rosado. Estos corresponden a reticulocitos y su presencia aumentada sugiere una respuesta medular activa. Se reporta como moderada (2+) cuando afecta al 5-20% de las células y marcada (3+) cuando supera el 20%.

Los eritroblastos (precursores nucleados de eritrocitos) deben reportarse por cada 100 células blancas contadas. Su presencia en sangre periférica puede indicar respuesta a anemia severa o infiltración medular.

En cuanto a las inclusiones eritrocitarias, destacan:

• Cuerpos de Howell-Jolly: restos nucleares que aparecen como pequeños puntos púrpura, observables en asplenia, hiposplenia o anemias severas.

• Punteado basófilo: agregados de ribosomas distribuidos por todo el eritrocito, visible en talasemias, intoxicación por plomo y anemias megaloblásticas.

• Anillos de Cabot: estructuras en forma de anillo o figura de ocho, presentes en anemias intensas y diseritropoyesis.

• Cuerpos de Pappenheimer: inclusiones férricas visibles en anemia sideroblástica y talasemia.

💡 Observación clínica: La presencia de cuerpos de Howell-Jolly es un excelente indicador de la función esplénica; su aparición sugiere hipofunción o ausencia del bazo, incluso en pacientes sin historia de esplenectomía.

Inclusiones Eritrocitarias y Fenómenos de Agrupación

Las inclusiones eritrocitarias proporcionan información valiosa sobre diversos trastornos hematológicos. El punteado basófilo se reporta como moderado (2+) cuando afecta al 5-20% de las células y marcado (3+) cuando supera el 20%, mientras que para los Cuerpos de Howell-Jolly, Cuerpos de Pappenheimer y Anillos de Cabot, los umbrales son 2-3% para moderado y >3% para marcado.

Los Cuerpos de Howell-Jolly son restos nucleares que normalmente son eliminados por el bazo, por lo que su presencia indica disfunción esplénica. Aparecen como pequeñas inclusiones redondeadas de color púrpura oscuro, generalmente excéntricas.

El punteado basófilo consiste en agregados de ribosomas distribuidos por todo el eritrocito. Se observa en síndromes talasémicos, intoxicación por plomo, anemias megaloblásticas y síndromes dismielopoyéticos.

Los Anillos de Cabot aparecen como estructuras en forma de anillo o figura de ocho. Se cree que están formados por microtúbulos del huso mitótico y se observan en anemias intensas y diseritropoyesis.

Los Cuerpos de Pappenheimer son inclusiones que contienen hierro, visibles con tinción azul de Prusia. Se encuentran principalmente en anemias sideroblásticas y talasemias.

También es importante reconocer fenómenos de agrupación como:

• Rouleaux o pilas de moneda: alineamiento de eritrocitos que semeja una pila de monedas. Se observa en hiperproteinemias (mieloma múltiple), macroglobulinemias y enfermedades inflamatorias crónicas.

• Autoaglutinación: agrupamiento irregular de eritrocitos causado por anticuerpos IgM (aglutininas frías) dirigidos contra antígenos eritrocitarios.

💡 Consejo clínico: El fenómeno de Rouleaux puede confundirse con aglutinación, pero tiene distinto significado diagnóstico. El Rouleaux sugiere aumento de proteínas (como en mieloma múltiple), mientras que la aglutinación indica presencia de anticuerpos contra eritrocitos.

Evaluación de los Glóbulos Blancos

La evaluación de leucocitos en el extendido de sangre periférica incluye tanto el análisis cuantitativo como el morfológico. Para estimar el número total de leucocitos, se cuenta el promedio en cinco campos visuales con objetivo 10x y se multiplica por 300. Sin embargo, este cálculo es aproximado y no debe reemplazar al conteo automatizado.

La OMS recomienda realizar un recuento diferencial en 200 glóbulos blancos para el diagnóstico y seguimiento de leucemia mieloide aguda y síndromes mielodisplásicos, aunque en la rutina habitual se suelen contar 100 células.

Entre las principales alteraciones morfológicas de los leucocitos destacan:

• Fenómeno de Pelger-Huet: anomalía de los granulocitos caracterizada por excesiva condensación de la cromatina e incapacidad del núcleo para lobularse. Puede ser hereditaria (benigna) o adquirida (asociada a trastornos mieloproliferativos).

• Hipersegmentación de neutrófilos: aumento del número de lobulaciones nucleares (más de 5 lóbulos). Característica de eritropoyesis megaloblástica, como en deficiencia de vitamina B12 o ácido fólico.

• Granulaciones tóxicas: gránulos azul-negro en el citoplasma de neutrófilos, asociados a infecciones agudas, intoxicaciones y quemaduras.

• Cuerpos de Döhle: inclusiones azul claro en la periferia del citoplasma de neutrófilos. Aparecen en infecciones, quemaduras, embarazo y en pacientes bajo quimioterapia.

💡 Para recordar: El ICSH recomienda que los neutrófilos en banda sean contados como neutrófilos segmentados en el diferencial, aunque se deben mencionar en las observaciones si están aumentados, ya que esto puede indicar una respuesta inflamatoria aguda.

Alteraciones Morfológicas de los Leucocitos

Las alteraciones morfológicas en los leucocitos son indicadores importantes de diversas condiciones patológicas. La correcta identificación y clasificación de estas alteraciones ayuda a orientar el diagnóstico.

Los Cuerpos de Döhle se reportan como moderados (2+) cuando afectan al 2-4% de los neutrófilos y marcados (3+) cuando superan el 4%. Son estructuras de retículo endoplásmico rugoso que aparecen como inclusiones azul claro en el citoplasma.

Las vacuolas en neutrófilos reflejan actividad fagocítica aumentada. Se consideran moderadas (2+) cuando afectan al 4-8% de las células y marcadas (3+) cuando superan el 8%. Pueden indicar estrés celular, como en quemaduras e infecciones graves.

La hipogranulación e hipergranulación (granulaciones tóxicas) también se clasifican como moderadas (2+) al 4-8% y marcadas (3+) cuando superan el 8%. Las granulaciones tóxicas son particularmente relevantes como indicadores de infecciones bacterianas severas.

Los Cuerpos de Auer son estructuras elongadas rojizas que aparecen en células inmaduras de pacientes con leucemia mieloide aguda. Constituyen un marcador morfológico que ayuda a diferenciar leucemias agudas mieloides de las linfoides.

Los linfocitos reactivos responden a enfermedades virales y estímulos inmunológicos con características morfológicas distintivas. Se recomienda utilizar este término específico (en lugar de "atípicos") y reportarlos como porcentaje del total de linfocitos contados. Son especialmente frecuentes en mononucleosis infecciosa, toxoplasmosis y citomegalovirus.

💡 Dato clínico relevante: Hasta un 6% de linfocitos reactivos puede considerarse normal, por lo que valores por debajo de este umbral generalmente no se informan. Sin embargo, porcentajes más altos sugieren una respuesta inmunológica activa.

Evaluación de Neutrófilos y Plaquetas

Los neutrófilos necrobióticos representan células en proceso de apoptosis o muerte celular programada. Su aumento se observa en procesos infecciosos, leucemia mieloide aguda, síndromes dismielopoyéticos y anemia perniciosa. Un dato técnico importante es que la necrobiosis también puede ser causada por el tiempo prolongado que permanecen las muestras a temperatura ambiente antes de ser procesadas (observable desde las primeras dos horas).

Es importante señalar que el ICSH recomienda contar los neutrófilos en banda como neutrófilos segmentados en el diferencial, aunque se debe hacer la observación correspondiente si hay un aumento significativo, ya que esto puede indicar infección bacteriana aguda.

Para las plaquetas, el análisis incluye tanto su número como su morfología. El recuento indirecto se realiza contando las plaquetas en 5-10 campos con objetivo 100x, obteniendo el promedio y multiplicándolo por un factor de conversión (aproximadamente 20,000). Este estimado debe correlacionarse con el conteo automatizado.

En cuanto a la morfología plaquetaria:

• Una plaqueta normal mide 1.5-3 μm de diámetro
• Las plaquetas grandes miden 3-7 μm (similar al tamaño de un eritrocito)
• Las plaquetas gigantes miden 10-20 μm (mayores que un glóbulo rojo)

Las plaquetas gigantes se clasifican como moderadas (2+) cuando representan el 11-20% del total y marcadas (3+) cuando superan el 20%. Su presencia puede indicar trastornos como trombocitopenia inmune o síndromes mieloproliferativos.

Las plaquetas hipogranulares muestran escasos o ningún gránulo púrpura-rojo en su interior, lo que puede ocurrir en síndromes mielodisplásicos.

💡 Recuerda: El tamaño plaquetario es inversamente proporcional al recuento en muchas patologías; cuando las plaquetas están disminuidas pero son grandes, suele indicar una médula ósea que intenta compensar la trombocitopenia.